一文详解snRNA-seq
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小果又来喽!今天小果看到了一些snRNA-seq的数据,那snRNA-seq是什么,又与scRNA-seq有什么异同呢,下面小果就和大家分享一下。
snRNA-seq是单细胞核酸测序(single nucleus RNA sequencing)的一种方法,它可以用于在单个细胞核级别上研究细胞表型。相比于传统的单细胞RNA测序,单个细胞核的RNA可以更容易地被捕获,因此可以更好地保留细胞的原始特性,并且不会受到细胞溶解等因素的影响。
在snRNA-seq中,单个核被包裹在胶体颗粒中,其中包含了反转录和扩增RNA的反应混合物。反转录后,扩增产物将被测序。该技术难度较高,因为核提取和反转录需要特别的注意以避免RNA降解和/或RNA质量退化造成的误差。
snRNA-seq在各种研究方向中都已经得到了广泛应用,比如神经系统、肿瘤学、心血管生物学等。例如,上述第二篇知识来源描述的研究使用snRNA-seq对心脏组织进行了分析,揭示了新生儿心脏中有一个未成熟的心肌细胞群体,这个群体会响应心脏组织受损,并启动基因调控网络来支持再生反应。
scRNA-seq和snRNA-seq的异同有哪些呢?
scRNA-seq和snRNA-seq都是单细胞级别的RNA测序方法,它们主要的区别在于样本处理过程中所使用的细胞类型。scRNA-seq用于研究单个完整的细胞,包括细胞核和细胞质中的RNA;而snRNA-seq用于研究单个细胞核中的RNA。因此,相比于scRNA-seq,snRNA-seq可以更好地保留细胞的原始特性,并且不会受到细胞溶解等因素的影响。
通常情况下,snRNA-seq的数据量较小,需要对数据质量进行严格的控制和筛选。另外,在数据预处理和分析方面,由于细胞核提取和反转录等步骤的影响,snRNA-seq与scRNA-seq也存在一些不同之处。
综上,尽管scRNA-seq和snRNA-seq都是单细胞RNA测序方法,它们在样本处理、数据量和数据预处理等方面具有不同的特点和应用。选择合适的方法取决于研究对象、科学问题和实验条件。
snRNA-seq也可以使用seurat进行下游分析,代码示例如下:
#加载包
library(Seurat)
#加载数据
counts <- Read10X("path/to/filtered_gene_bc_matrices_h5.h5")
metadata <- read.csv("path/to/metadata.csv")
# 创建Seurat对象
seurat <- CreateSeuratObject(counts, metadata)
seurat <- NormalizeData(seurat)
seurat <- FindVariableFeatures(seurat)
seurat <- ScaleData(seurat)
#降维、聚类
seurat <- RunPCA(seurat)
seurat <- FindNeighbors(seurat, dims = 1:20)
seurat <- FindClusters(seurat, resolution = 0.6)
seurat <- RunUMAP(seurat)
# 可视化结果
DimPlot(seurat, reduction = "umap", label = TRUE)
以上就是小果的分享,大家学会了吗?也可以找一些单细胞核测序数据进行实践哦。
在分析过程中,不可避免会遇到基因名称转换过程,那这里小果给大家推荐一个实用快捷的小工具:不同物种之间的同源基因名称转换(http://www.biocloudservice.com/118/118.php)大家可以用起来哦。
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